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毛细管色谱柱的活化再生说明

   毛细管色谱柱的活化再生说明
  毛细管色谱柱型号PEG-20M的柱效降低主要特征性现象有柱压基本正常,但出现拖尾峰、秃峰、分叉峰、前延峰、峰变宽、基线漂移、理论板数降低、分离度降低等。需要进行再生处理,具体方法可参考:
  1.一般情况下,顺接色谱柱,按如下溶剂顺序及条件冲洗:
  95%水-5%甲醇(或乙腈)(1.0ml/min,1h以上)→100%甲醇(1.0ml/min,1h以上)→100%乙晴(1.0ml/min,1h以上)→75%乙晴-25%异丙醇(0.5ml/min,10倍柱体积以上)→100%异丙醇(0.5ml/min,10倍柱体积以上)→100%二氯甲烷(0.5ml/min,10倍柱体积以上)→100%正己烷(0.5ml/min,10倍柱体积以上,根据实际情况可忽略)→100%异丙醇(0.5ml/min,20倍柱体积以上)→95%水-5%甲醇(或乙腈)(0.5ml/min,30min;再升至1.0ml/min,10倍柱体积以上)→检测用流动相平衡2h或至基线平稳,进样测试。
  在冲洗过程中,随时关注柱压变化,确保不超过4000psi;若超出,可通过降低流速,升高柱温来调整,具体操作可咨询具备相关专业知识背景和实践经验的人士。
  2.若上述方法效果不理想,可按如上溶剂顺序和条件,先反接色谱柱冲洗→再顺接色谱柱,用100%乙腈以1ml/min流速冲洗约2h→再用与流动相同比例的水-有机相以1ml/min流速冲洗约30min→最后用流动相平衡2h或至基线平稳,进样测试即可。
  3.特别说明:
  再生过程必须随时关注柱压变化,柱压过高易导致硅胶变形与开裂及键合相极性端连接顺序紊乱,同时要保证再生时间足够。
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