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弱极性色谱柱的反冲技术简析

   弱极性色谱柱是实验室常用的一种色谱耗材,通常情况下选择色谱柱都会从它的固定相,色谱柱的长度、规格、口径还有膜厚度来进行选择。色谱柱上基本都有->标志,表示流动相的流动方向,有的在色谱柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字样,翻译成“绝不能反冲”的意思,但在工作中,用色谱柱反冲技术修复色谱柱可起到柱效提高、柱效恢复的效果。
  色谱柱使用一段时间后柱效下降,此时可拆下柱入口端螺帽,去掉1-2mm被污染填料,再用相同填料填满,然后用流动相反冲一下,可使柱效恢复,因反冲可以改善柱头死空间。
  因反冲可把沉积在过渡板上的细微颗粒冲走,有时也可用反冲技术使柱压降低。
  一些色谱柱的反冲介绍:
  如果是已经保存好的色谱柱:
  1.反向接柱,先用95水:5乙腈0.2 ml/min,冲20倍柱体积;然后用(CH2)4O,0.2 ml/min,冲20倍柱体积;最后用95乙腈:5水,0.2 ml/min,冲20倍柱体积;
  2.正向接柱,用65乙腈水保存色谱柱。
  如果是刚走完样的色谱柱:
  1.卸掉保护柱;
  2.正向接柱,常规方法冲洗色谱柱(先95水,后95乙腈或甲醇);
  3.反向接柱,先用95水:5乙腈0.2 ml/min,冲20倍柱体积;然后用(CH2)4O,0.2 ml/min,冲20倍柱体积;最后用95乙腈:5水,0.2ml/min,冲20倍柱体积;4.正向接柱,用65乙腈水保存色谱柱。
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